цитология легких что показывает
Цитология легких что показывает
Созданная в 1959 г международная номенклатура опухолей человека послужила исходной основой для создания гистологическкх классификаций опухолей специальными комиссиями ВОЗ. В настоящее время имеются 2 серии цитологических классификаций ВОЗ и одна СЭВ, в которых отражены только некоторые локализации новообразований. В вышедшей в 1985 г. книге «Цитологическая диагностика опухолей и предопухолевых процессов» при описании новообразований за основу были взяты имеющиеся гистологические классификации ВОЗ с учетом возможностей цитологического метода и имеющиеся уже цитологические классификации.
При острых воспалительных заболеваниях в эпителии могут развиваться реактивные изменения, симулирующие новообразование и являющиеся причиной ошибочного диагноза, иногда же. наоборот, воспалительный процесс маскирует опухоль.
Достоверная цитологическая диагностика туберкулеза легких основана на обнаружении в мазках из мокроты или содержимого бронхов двух видов клеток эпителноидных и клеток Пирогова — Лангханса.
При цитологической диагностике опухолей легких процент обнаружения опухолевых клеток зависит от расположения опухоли в верхних или нижних долях, от формы роста. Около половины всех злокачественных опухолей легкого приходится на долю плоскоклеточного неороговевающего и ороговевающего рака. Цитологический материал при раке легкого характеризуется полиморфизмом размеров и формы клеток, которые располагаются среди слизи и бесструктурных масс.
Клетки плоскоклеточного ороговевающего рака лежат разрозненно или скоплениями. Изредка они располагаются в виде луковиц. Ядра опухолевых клеток, чаще всего гилерхромны, с грубым, неравномерно распределенным хроматином с неровными контурами. По форме ядра — неправильно округлые, палочковидные. Цитоплазма клеток плотная, часто с признаками жировой дегенерации. При плоскоклеточном ороговевающем раке нередко отмечают раннее ороговение.
Плоскоклеточный неороговевающий рак характеризуется наличием крупных округлых клеток, расположенных разрозненно или в виде комплексов. Ядра крупные, расположены центрально и занимают большую часть клетки, хроматин нежный, равномерно распределен по ядру. В ядрах нередко встречаются ядрышки, иногда гипертрофированные.
При железистой форме рака обнаруживают атипичные клетки крупных, средних и иногда мелких размеров округлой, овальной, призматической формы. Клетки расположены разрозненно, в виде железистых структур, папиллярных образований. Ядра крупные, округлой или овальной формы, расположены чаще всего эксцентрично. Хроматин нежный, в ядрах часто видно по нескольку гипертрофированных ядрышек. Встречаются дву- и трехъядерные клетки, цитоплазма очень нежная, в одних клетках она узким ободком окружает ядро, в других — занимает больший объем, вакуолизированная.
В зависимости от степени зрелости клеток можно говорить о степени дифференцировки данного варианта опухоли.
При недифференцированном мелкоклеточном раке опухолевые клетки расположены разрозненно, плотными группами, следующими друг за другом по ходу слизи, скоплениями. Клетки мелкие, округлые, напоминают лимфоциты. Ядра их крупные, плотные, гиперхромные, с компактным хроматином занимают почти всю клетку. Цитоплазма узеньким, еле заметным ободком окружает ядро. В комплексах клетки настолько тесно прилежат друг к другу, что в соседних клетках образуются вдавления, в связи с чем они принимают самую разнообразную форму треугольную, палочковидную, полулунную. Ядра принимают форму клетки.
Крупноклеточный недифференцированный рак характеризуется наличием крупных светлых клеток, расположенных разрозненно или в виде комплексов. Ядра повторяют форму клетки. Хроматин нежно-гранулярный или мелкопетлистый, равномерно распределен по ядру. Цитоплазма узеньким ободком окружает ядро, клетки часто выглядят голоядерными.
При цитологической диагностике заболеваний органов пищеварения исследуются смывы из пищевода, желудка, двенадцатиперстной, сигмовидной, прямой кишки («слепой» способ), целенаправленные смывы под визуальным контролем, аспираты через катетер, подведенный к участку поражения; соскобы нейлоновой щеткой во время эзофаго-, гастро-, дуодено-, сигмо-, ректоскопии; аспираты и соскобы щеткой из общего желчного и главного панкреатического протока во время ретроградной эндоскопической панкреатохолангиографии; пунктаты слюнных желез, печени; пунктаты, соскобы и отпечатки из различных органов брюшной полости при лапароскопии; асцитическая жидкость.
В пищеводе встречаются доброкачественные опухоли, такие как плоскоклеточная папиллома, а также некоторые неопухолевые заболевания эзофагиты различного происхождения, лейкоплакии. При цитологическом исследовании материала, полученного ил пищевода в этих случаях, в препаратах обнаруживается значительное количество клеток плоского эпителия и лейкоцитов. Нередко встречаются эпителиальные клетки в состоянии дистрофии
Из злокачественных новообразований в пищеводе встречают преимущественно плоскоклеточный рак, реже аденокарциному. Для цитологической картины плоскоклеточного рака характерно наличие детрита, разрушенных клеток-чешуек плоского эпителии, крупных полигональных клеток и клеток округлой формы. Ядра клеток грубые, пикнотизированные с неровными контурами, грубым глыбчатым хроматином. Цитоплазма преимущественно широкая, гомогенная от базофильной до почти бесцветной, местами с розоватым оттенком, мелковакуолизированная.
Цитологическая диагностика заболеваний бронхолегочной системы
Исследование мокроты и мочи на атипичные клетки
Показанием к цитологическому исследованию служит необходимость установить (уточнить) природу неопухолевого заболевания или верифицировать процесс при наличии очаговых изменений в легких, выявленных лучевым методом диагностики.
Получение материала
Материалом для цитологического исследования может служить: материал бронхоскопии (пунктат опухоли, отпечаток с биоптата, соскоб щеткой, бронхиолоальвеолярный лаваж (БАЛ), чресбронхиальная пункция (под визуальным контролем или под контролем УЗИ). При подозрении на опухолевый процесс и неудачах морфологического исследования этого материала выполняют трансторакальную пункцию. Кроме того, можно исследовать цитологическим методом материал, полученный при медиастиноскопии, торакоскопии, во время операции. При необходимости установить степень распространения опухолевого процесса исследуют материал из внелегочных очагов (лимфатические узлы, выпотная жидкость). Самым простым методом является цитологическое исследование мокроты. Преимущества этого метода – дешевый, легко повторяемый, недостатки – низкая выявляемость рака, сложности установления гистологической формы опухоли.
Из материала, полученного при бронхоскопии (торакоскопии, пункции) готовят традиционные мазки5 или, если получают жидкость или материал, помещают в контейнеры со стабилизирующим раствором (жидкостная цитология). В лаборатории с помощью цитоцентрифуги готовят тонкослойные препараты.
Мокрота – продукт патологического процесса (заболевания или повреждения) в дыхательной системе, выделяемый при кашлевом толчке. Свежевыделенную мокроту, полученную путем откашливания, собирают в чистую сухую широкогорлую склянку. Для получения полноценного материала должен быть “глубокий” кашель, собирать ее необходимо до еды, после чистки зубов. При подозрении на наличие злокачественной опухоли и отсутствии элементов рака при первом исследовании мокроту следует собирать три дня подряд. Собранную мокроту сразу же необходимо доставить в лабораторию, где ее нужно исследовать немедленно или хранить до исследования в холодильнике. Можно собирать мокроту в склянку с 40–50% спиртовым раствором (50 мл), в течение 3–5 дней, каждый раз после сбора тщательно встряхивая сосуд для того, чтобы мокрота перемешалась со спиртовым раствором.
Приготовление препаратов
Препараты готовят в лаборатории, распределяя отобранные под визуальным контролем комочки или, если мокрота собрана в спиртовый раствор, получают тонкослойные препараты с помощью цитоцентрифуги. В связи с тем, что клетки в мокроте часто подвержены дегенеративным изменениям, интерпретация клеточного состава может быть затруднена, поэтому метод применяют, в основном, как метод скрининга при отсутствии данных о злокачественном поражении, а также при предположительном диагнозе опухоли у тяжелых ослабленных больных.
Окрашивают препараты с помощью метода Романовского в любой модификации или гематоксилин-эозином. При исследовании мокроты один препарат окрашивают по Цилю-Нильсену для выявления кислотоустойчивых микобактерий.
Трактовка цитологического заключения
По составу клеток выделяют несколько вариантов БАЛ:
Цитологическое исследование мокроты
Добавить в корзину
Цитологическое исследование мокроты — метод лабораторной диагностики, с помощью которого изучают клеточный состав отделяемого слизистой гортани, трахеи и бронхов. Простота получения материала и диагностическая значимость ставят цитологическое исследование мокроты на одно из первых мест среди неинвазивных методов в пульмонологии. Состояние клеток в исследуемых образцах помогает выявлять развитие различных патологических процессов (онкологических, воспалительных, аутоиммунных, аллергических), контролировать течение заболевания и результат терапии.
В ряде случаев цитологическое исследование помогает определить причины и природу патологии, провести дифференциальную диагностику доброкачественных или злокачественных новообразований легких, для этого, исследование мокроты проводится в динамике.
При цитологическом исследовании в мокроте обнаруживаются клетки крови, эпителия, элементы распада тканей, кристаллы, микроорганизмы, простейшие, гельминты. Мокрота может содержать клетки злокачественных опухолей, особенно если опухоль растет эндобронхиально или распадается.
Клеточный состав мокроты имеет свои особенности при ряде патологий:
Цитологическое исследование мокроты помогает установить характер патологического процесса в органах дыхания, а в ряде случаев определить его причину.
Показания к проведению исследования
Диагностическая ценность метода зависит не только от проведения исследования, но и от правильного сбора мокроты.
Мокрота собирается утром натощак после чистки зубов и тщательного полоскания рта водой, путем откашливания в стерильный универсальный контейнер.
Исследование мокроты в Москве
Рак легких — распространенное злокачественное новообразование, которое чаще других онкологических заболеваний приводит к летальному исходу. Данное исследование может быть использовано в рамках раннего выявления рака легких в сочетании с бронхоскопией и другими методами диагностики.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Исследование мокроты?
Комплексная диагностика рака легких — особенно центрального подтипа — у пациентов с клинической картиной: кашель, кровохарканье и др.
Подробное описание исследования
Мокрота — это отделяемое, которое вырабатывается в легких, верхних и нижних дыхательных путях. В норме образование мокроты протекает практически без проявлений — её образуется настолько мало, что обычно человек незаметно для себя её проглатывает. По консистенции мокрота представляет собой слизь. При развитии патологических процессов в трахее, бронхах или легких количество и свойства мокроты обычно меняются. К последним можно отнести:
Изменение цвета. Мокрота может иметь прозрачный, зеленоватый, красноватый, ржавый и даже черный цвет. Некоторые заболевания (долевая пневмония, отек легких и др.) можно заподозрить уже по цвету выделившейся мокроты.
Изменение запаха. В норме мокрота не имеет запаха. Как правило, его появление связано с застоем мокроты в бронхах или полостях легкого.
Изменение консистенции. Мокрота может выделяться в виде густой или жидкой слизи. Во многом консистенцию мокроты определяет её состав, в котором могут содержаться клетки иммунной защиты (лейкоциты), антитела и другие белки, микроорганизмы, а также частицы инородных веществ. Также в мокроте могут быть различные примеси, которые можно увидеть невооруженным глазом: гнойные пробки, фиброзные сгустки, кусочки омертвевших тканей и др.
В медицинской практике исследование мокроты является многофункциональным, поэтому при помощи разных методов его могут проводить для диагностики инфекционных, аллергических и онкологических заболеваний органов дыхания. Данный лабораторный тест — цитологический анализ — мокроты направлен на выявление у больного злокачественного новообразования в лёгких.
Для цитологического исследования (цитологии) можно использовать откашливаемую мокроту (утреннюю порцию), а также мокроту, полученную во время эндоскопического обследования бронхов. Полученный материал наносят на предметные стекла и производят микроскопическое исследование (микроскопию) мазка. Данный метод позволяет выявить в исследуемом образце мокроты раковые или атипичные клетки.
Установлено, что цитология мокроты чаще всего — около 70 % случаев — обнаруживает центральный рак лёгкого, реже (40 %) – периферический рак легкого. Их отличие заключается в следующем: центральный рак представляет собой опухоль в условном центре легкого — корне (крупные бронхи и сосуды), а периферический рак — это новообразование на периферии легочной ткани. Одним из преимуществ цитологического метода диагностики также является то, что с помощью него можно выявить даже рак легких на начальных стадиях (in situ).
Цитологического исследование мокроты является простым и неинвазивным тестом, который можно использовать при ранней диагностике патологий легких. Для более точной верификации исследование рекомендуется проводить 5-6 раз и в сочетании с бронхоскопией.
Цитология легких что показывает
Мелкоклеточный рак легкого (МРЛ) составляет 13% всех опухолей легкого [1]. МРЛ является формой рака легкого с характерными клиническими характеристиками, чувствительностью к химиотерапии, генетическими особенностями и морфологической картиной. МРЛ — особый гистологический тип опухоли, характеризующийся высокой скоростью роста, быстрым удвоением опухоли и ранним развитием метастазов. У подавляющего большинства пациентов развитие МРЛ связано с курением. У 75—90% пациентов имеется мутация гена TP53, определяющая экстремальную генетическую нестабильность, что приводит к агрессивному, очень сложному заболеванию на молекулярном уровне с большим количеством мутаций. В отличие от немелкоклеточного рака легкого, в лечении которого достигнуты значительные успехи с использованием целевых методов, для МРЛ до сих пор нет одобренных таргетных препаратов [2]. Химиотерапия на основе платины является основным методом лечения МРЛ, который очень чувствителен к начальной химиотерапии с добавлением лучевой терапии и профилактического краниального облучения. Хирургическое лечение при МРЛ невозможно, поскольку практически у 95% пациентов при постановке диагноза имеются отдаленные метастазы. Общая 5-летняя выживаемость составляет менее 7% [2]. Основное внимание уделяется дифференциальной диагностике. МРЛ диагностируют от лимфом, плоскоклеточных, железистых и крупноклеточных карцином, которые чаще всего удаляются хирургическим путем или требуют другого химиотерапевтического лечения. Предоперационно диагноз МРЛ ставится на основании морфологического исследования материала малых биопсий и цитологических образцов. Проблема состоит в том, что часто из-за морфологических особенностей опухоли возникают сложности в диагностике как на цитологическом, так и на гистологическом материале.
Цель исследования — улучшение морфологической диагностики МРЛ на материале бронхобиопсий.
Материал и методы
Ретроспективно проанализированы цитологические и гистологические препараты у 34 пациентов с диагнозом МРЛ за 2016—2017 гг. Для цитологического исследования брали мазки-отпечатки с кусочка биоптата, полученного при бронхобиопсии. Цитологические препараты окрашивали по Паппенгейму. Гистологические препараты подвергали стандартной гистологической проводке и окрашивали гематоксилином и эозином. Для иммуногистохимического исследования использовали систему детекции EnVision Flex («Dako», Дания) и антитела к общим цитокератинам, хромогранину А, синаптофизину, CD56, Ki-67, СК5/6, СК7 и TTF1 («Dako», Дания).
Результаты и обсуждение
У 34 пациентов с диагнозом МРЛ уверенное цитологическое заключение составляет 59%, гистологическое — 21%, злокачественное круглоклеточное мелкоклеточное новообразование, больше данных за МРЛ — 68%. Достаточно низкая воспроизводимость диагноза МРЛ без дополнительного иммуноморфологического исследования связана с морфологическими особенностями опухоли.
Несмотря на характерную цитологическую картину, клеточные элементы МРЛ часто разрушены, вследствие чего в 23% наблюдений заключение дается в предположительной форме.
Исходя из полученных данных, гистологическое исследование МРЛ на материале бронхобиопсий вызывает трудности. Как правило, опухолевые клетки располагаются в хаотично расположенных пластах, разделенных тонкой соединительнотканной перегородкой, но могут присутствовать розетки, периферические палисадоподобные структуры, гнезда, цепочки и редко трубочки. Диффузная картина роста может напоминать злокачественную лимфому. Редко возникают сосочки, когда периваскулярные опухолевые клетки остаются жизнеспособными, а на остальных участках выражен некроз [4, 5]. На качество гистологического материала при МРЛ из-за особенностей опухолевых клеток влияет гистологическая проводка. Хрупкие опухолевые клетки не выдерживают гистологическую проводку с агрессивными химическими реактивами, сморщиваются и разрушаются, поэтому оценить клеточную характеристику сложно. Клетки мелкие, с плохо выраженными цитологическими критериями МРЛ. Характерным симптомом является базофильная «инкрустация» стенок сосудов ДНК из некротизирующихся опухолевых клеток (ядерный мусор, эффект Azzopardi) [6, 7]. Наиболее частое гистологическое заключение — злокачественное мелкое круглоклеточное новообразование. Митотический индекс высокий, в среднем 60—80 митозов на 2 мм площади. В малых биопсиях митозы иногда трудно идентифицировать, материал часто представлен некротическими массами, иногда некроз может отсутствовать из-за ограниченного отбора проб. На материале малых биопсий в случае небольших образцов инвазивный компонент опухоли может быть не обнаружен и оценка производится только на ограниченном количестве цитологических критериев. Артефакт раздавливания часто встречается в малых биопсиях и может затруднить гистологическую интерпретацию [8, 9].
Кроме того, на качество гистологических препаратов влияют такие факторы, как небольшие измельченные образцы биопсии, ишемические изменения, плохая фиксация и некачественно приготовленные гистологические препараты.
Решить сложности морфологической диагностики МРЛ позволяет иммуноморфологическое исследование. Иммуногистохимическое исследование гистологического материала проведено в 90% наблюдений, что позволило уточнить диагноз МРЛ. Для МРЛ характерна экспрессия маркеров нейроэндокринной дифференцировки: CD56, хромогранина A и синаптофизина, которые лучше всего использовать совместно. CD56 экспрессировался практически в 100% наблюдений, синаптофизин — в 70%, хромогранин, А — в 26%. Индекс пролиферативной активности Ki-67 в МРЛ высокий, составляет в среднем 70—90%. Несмотря на то что иммуногистохимическое исследование существенно помогает в постановке диагноза МРЛ, интерпретация иммуногистохимической картины должна быть тщательно выполнена в соответствии с морфологическим исследованием. Одинаковая иммуногистохимическая картина экспрессии антител отмечена при других нейроэндокринных опухолях легких (включая карциноид и крупноклеточную нейроэндокринную карциному), а также при метастатических нейроэндокринных карциномах из других органов.
Дифференциальная диагностика проводится с низкодифференцированным плоскоклеточным и аденогенным раком, лимфомой, хроническим воспалительным инфильтратом и атипичным карциноидом. Для дифференциальной диагностики МРЛ и низкодифференцированного плоскоклеточного и аденогенного рака используется следующая панель маркеров: TTF1, СК7, напсин А, СК5/6 и белок р63 (р40). На нашем материале в 2 наблюдениях проведено иммуногистохимическое исследование и диагностирован плоскоклеточный и аденогенный рак. По данным литературы, в 70—90% МРЛ присутствует экспрессия TTF1, но необходимо учитывать, что он может быть положительным в 44—80% внелегочных мелкоклеточных карциномах (рис. 2 ). 
Рис. 2. Метастаз мелкоклеточного рака легкого в лимфатическом узле. а — окраска по Паппенгейму; б—е — иммуноцитохимическое исследование, экспрессия: б — общих цитокератинов; в — CD56; г — хромогранина А; д — CD45; e— TTF1. ×500. Лимфоидные инфильтраты, будь то неходжкинская лимфома или хроническое воспаление, можно отличить от МРЛ по их фолликулоподобной картине роста, контрастирующей с эпителиальной кластеризацией и краш-синдромом при МРЛ. В редких наблюдениях возникает необходимость дифференциальной диагностики МРЛ с атипичным карциноидом. В одном наблюдении гистологически высказано подозрение на МРЛ. Проведено иммуногистохимическое исследование, подтвердившее нейроэндокринную природу опухоли, индекс Ki-67 составил 30%. На основании гистологического и иммуногистохимического исследования диагностирован МРЛ. Согласно классификации ВОЗ (2015), для атипичного карциноида индекс Ki-67 составляет 5—20%, для МРЛ — более 50%. Таким образом, индекс Ki-67 20—50% составляет серую зону. Дополнительным фактором служит наличие очагового некроза в атипичном карциноиде и выраженного в МРЛ, который в нашем наблюдении отсутствовал. Некоторые авторы сообщают о нейроэндокринных опухолях легких с морфологическими признаками карциноидных опухолей, но с высокой митотической активностью и индексом Ki-67 более 20%. В отличие от гастроэнтеропанкреатических нейроэндокринных опухолей использование Ki-67 для классификации легочных карциноидов еще обсуждается. Нередки случаи отдаленных метастазов карциноидных опухолей (рис. 3 ). 
Рис. 3. Метастаз атипичного карциноида легкого в печени. Окраска по Паппенгейму, ×500. В большинстве случаев (около 40%) на образце малой биопсии из-за недостаточного количества материала недооценивается пролиферативная активность опухоли [10—14].
В классификации ВОЗ (2015) опухолей легких выделено два подтипа МРЛ: классический и комбинированный. При комбинированном МРЛ компонент немелкоклеточного рака составляет не менее 10% объема опухолевого узла. По данным литературы [13], комбинированный МРЛ составляет 10—28% наблюдений: сочетание с крупноклеточным раком — 16%, аденокарциномой — 9% и плоскоклеточной карциномой — 3%. Морфологи не всегда отмечают комбинированный характер опухоли. В большинстве комбинированных опухолей МРЛ является преобладающим компонентом. Поскольку присутствие компонента МРЛ определяет прогноз и терапию заболевания, необходимо определение этого компонента в опухоли. Если диагноз МРЛ подтвержден, следует рассмотреть очень редкую возможность комбинированного МРЛ с компонентом аденокарциномы. Увеличивается число сообщений о мутации гена EGFR в компоненте аденокарциномы при комбинированном МРЛ, что повышает вероятность лечения ингибиторами тирозинкиназы [15].
Чрезвычайно редко МРЛ встречается у некурильщиков. В этом случае диагноз должен быть тщательно документирован с иммуногистохимической оценкой, чтобы исключить лимфому, меланому, карциноид и PNET.
Гистологическая трансформация в МРЛ может происходить у 3—15% пациентов с немелкоклеточным или комбинированным раком легкого, особенно при лечении ингибиторами тирозинкиназы. Гистологическую трансформацию в МРЛ можно заподозрить у пациентов с клинически ухудшающимся течением заболевания. Поэтому настоятельно рекомендуют проводить биопсию каждого нового очага поражения.
Заключение
МРЛ является особой формой рака легкого с характерными морфологическими особенностями. На качество гистологического материала при МРЛ из-за особенностей опухолевых клеток влияет гистологическая проводка. В цитологических препаратах мазков-отпечатков биоптатов опухоли, полученных при бронхобиопсии, опухолевые клетки МРЛ сохраняются лучше, чем в гистологических препаратах, прошедших агрессивную химическую проводку. Иммуногистохимическое исследование для уточнения диагноза МРЛ потребовалось провести в 90% наблюдений.
Цитология является надежным методом, часто более информативным, чем малая биопсия со скудным количеством опухолевых клеток и выраженным краш-синдромом. Совместное применение цитологического и гистологического исследования при МРЛ должно быть стандартом морфологической диагностики, повышающим эффективность предоперационной морфологической диагностики.
Концепция и дизайн исследования — Н.Н.В., О.В.Б.
Сбор и обработка материала — О.В.Б., А.Г.Е., В.Ю.М.
Написание текста — О.В.Б.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.